Hệ thống PCR đa kênh thời gian thực - Dòng ToronPCR™ M
Hệ thống PCR thời gian thực (qPCR) 96 giếng với 4 hoặc 6 kênh huỳnh quang
Hệ thống PCR thời gian thực đa kênh ToronPCR™ M Series thực hiện 96 phản ứng cùng lúc với 4 hoặc 6 kênh huỳnh quang, được thiết kế cho phân tích biểu hiện gen, định kiểu gen và xét nghiệm đa mục tiêu. Mô-đun hình ảnh CMOS thu toàn bộ đĩa trong một lần phơi sáng, do đó mọi giếng đều được đọc cùng một lúc. Mô hình 4 kênh phù hợp với bảng mục tiêu kép và ba mục tiêu, trong khi mô hình 6 kênh hỗ trợ tối đa sáu mục tiêu trên mỗi giếng. Mỗi mô hình đều có định dạng ống 0.2 mL hoặc 0.1 mL.
Khối nhiệt đa vùng với điều khiển gradient sáu vùng cho phép thực hiện thử nghiệm nhiều điều kiện ủ khác nhau. Màn hình cảm ứng Windows 10.1 inch xử lý thiết lập, phát hiện, phân tích và lưu trữ mà không cần kết nối với máy tính. Phần mềm tự động phân loại kết quả dương tính và âm tính, đồng thời hỗ trợ phân tích định lượng, định kiểu gen, đường cong nóng chảy và phân tích đẳng nhiệt. Thuật toán Ct của nó hoạt động mà không cần thuốc nhuộm tham chiếu, giúp đơn giản hóa thiết lập phản ứng.
Khả năng phát hiện đạt đến mức một bản sao duy nhất. Dải động trải rộng từ 10⁰ đến 10¹⁰ bản sao/μL, và độ lặp lại Ct duy trì ở mức CV ≤ 1%. Kết nối USB, LAN và kết nối không dây mở rộng cho phép truyền dữ liệu đến hệ thống thông tin phòng thí nghiệm (LIS) hoặc máy tính. Kết quả được xuất ra dưới dạng tệp Excel hoặc PDF. Các phòng thí nghiệm nghiên cứu, nhóm nghiên cứu lâm sàng và đội pháp y sử dụng thiết bị qPCR 96 giếng này cho các công việc có khối lượng mẫu lớn.
Hệ thống PCR đa kênh thời gian thực - Ứng dụng dòng ToronPCR™ M
Dòng sản phẩm ToronPCR™ M Series phục vụ các phòng thí nghiệm cần khả năng xử lý mẫu quy mô lớn và phát hiện đa mục tiêu trong một lần chạy duy nhất.
- Phân tích biểu hiện gen: Định lượng mức độ mRNA trên nhiều mẫu và bản sao với định lượng tương đối hoặc tuyệt đối dựa trên Ct
- Phân tích kiểu gen và phát hiện SNP: Phân tách các mẫu đồng hợp tử và dị hợp tử bằng phương pháp phân biệt alen hai màu
- Bảng mục tiêu đa kênh: Phát hiện tối đa sáu mục tiêu trên mỗi giếng trong một lần chạy, giúp tiết kiệm thể tích mẫu và thuốc thử.
- Phân tích đột biến và metyl hóa: sàng lọc các biến thể trình tự và trạng thái methyl hóa bằng phương pháp định lượng dựa trên đầu dò và đường cong nóng chảy
- Quy trình nhân bản và giải trình tự: xác minh các đoạn chèn và định lượng thư viện trước khi giải trình tự
- Nghiên cứu Y khoa và Lâm sàngHỗ trợ định lượng tải lượng virus và dấu ấn sinh học trong môi trường nghiên cứu.
- Phân tích pháp y: Định lượng các mẫu ADN vết, với độ nhạy xuống đến một bản sao duy nhất
- Khoa học ứng dụng: Thực hiện sàng lọc số lượng lớn trong lĩnh vực thực phẩm, nông nghiệp và môi trường.
Hệ thống PCR đa kênh thời gian thực - Các tính năng chính của dòng sản phẩm ToronPCR™ M
Dòng sản phẩm ToronPCR™ M kết hợp khả năng chụp ảnh đồng thời 96 giếng, ghép kênh linh hoạt và quy trình phân tích độc lập.
- Quang học hình ảnh hàng đầuGhi lại dữ liệu từ tất cả 96 giếng cùng một lúc, với độ trễ khoảng 1 giây cho mỗi kênh và không có độ trễ giữa các giếng.
- Đường dẫn ánh sáng dẫn bằng sợi quangTăng cường độ tín hiệu huỳnh quang, giảm tổn hao quang học và loại bỏ hiệu ứng rìa.
- 4 hoặc 6 kênh huỳnh quangBao gồm các loại đèn flash FAM/SYBR Green I, HEX/JOE/VIC, ROX/Texas Red và Cy5/Quasar-670, cùng với Cy5.5 và một kênh tùy chỉnh trên mẫu 6 kênh.
- Ghép kênh sáu mục tiêu: Không phát hiện hiện tượng rò rỉ tín hiệu hoặc nhiễu xuyên kênh trong quá trình quét sáu kênh, với hiệu suất khuếch đại từ 0.89 đến 1.05 và R² là 1.000
- Khối chuyển sắc đa vùngThiết lập các điều kiện phản ứng khác nhau trong khoảng nhiệt độ từ 1 đến 40 °C, do đó một lần chạy sẽ tối ưu hóa nhiệt độ ủ.
- Bù nhiệt độ khốiDuy trì độ đồng đều ±0.2 °C ở 95 °C trong khi gia nhiệt với tốc độ trung bình 3.5 °C/s
- Độ nhạy bản sao đơn: phát hiện tối thiểu 1 bản sao và đọc tuyến tính trên 10 bậc độ lớn.
- Độ lặp lại chính xác giữa các giếngKết quả cho thấy giá trị Ct trung bình là 18.50 với hệ số biến thiên (CV) là 0.3% trên 96 bản sao plasmid, và độ lệch chuẩn nhiệt độ nóng chảy là 0.05 °C.
- Độ phân giải thay đổi nếp gấp chính xác: phân biệt sự khác biệt khuôn mẫu gấp 2 lần và gấp 1.5 lần
- Thuật toán Ct không dùng thuốc nhuộm tham chiếuPhương pháp này phù hợp với các điểm đặc trưng đa đạo hàm để tính toán Ct mà không cần chuẩn hóa ROX, giúp rút ngắn thời gian thiết lập phản ứng.
- Giải thích kết quả tự động: Theo dõi độ khuếch đại trong thời gian thực và đưa ra kết quả dương tính và âm tính mà không cần tính toán thủ công.
- Màn hình cảm ứng độc lập 10.1 inchThực hiện cài đặt, phát hiện, phân tích và lưu trữ trên giao diện Windows mà không cần máy tính cáp nào tại chỗ.
- Bảo quản mẫu và kiểm soát độ ẩm: Giữ mẫu ở nhiệt độ 4 °C, và chức năng hút ẩm tự động giúp hạn chế sự ngưng tụ hơi nước xung quanh đĩa.
- Cấu hình mô-đunCho phép người mua lựa chọn số lượng kênh và định dạng ống 0.2 mL hoặc 0.1 mL.
- Kết nối linh hoạtCung cấp ba cổng USB, một cổng LAN và khả năng truyền dẫn không dây mở rộng với hỗ trợ LIS.
- Thiết kế tiết kiệm năng lượng: Kết hợp làm mát nhiệt điện với nguồn điện dòng không đổi để giữ mức tiêu thụ điện năng thấp.
Lý thuyết và Phương pháp
PCR thời gian thực khuếch đại trình tự mục tiêu thông qua các chu kỳ lặp đi lặp lại của quá trình biến tính, gắn mồi và kéo dài polymerase. Một tín hiệu huỳnh quang đi kèm với quá trình khuếch đại. Thuốc nhuộm SYBR Green I phát ra ánh sáng khi nó liên kết với DNA mạch đôi, và các đầu dò thủy phân giải phóng chất phát huỳnh quang khi polymerase cắt chúng. Bởi vì mỗi chu kỳ làm tăng gấp đôi mục tiêu, độ phát huỳnh quang tăng theo cấp số nhân trước khi các thành phần phản ứng cạn kiệt và đường cong đạt đến trạng thái bão hòa.
Chu kỳ ngưỡng (Ct) đánh dấu điểm mà độ phát huỳnh quang lần đầu tiên vượt quá mức nền. Các mẫu có lượng khuôn mẫu ban đầu nhiều hơn sẽ vượt qua ngưỡng sớm hơn, do đó Ct giảm theo đường thẳng khi logarit của lượng khuôn mẫu tăng lên. Một dãy pha loãng các mẫu chuẩn đã biết tạo nên đường thẳng đó, và độ dốc của nó cho biết hiệu suất khuếch đại: -3.32 tương ứng với 100%. Các xét nghiệm đa kênh đặt một chất phát huỳnh quang khác nhau trên mỗi đầu dò mục tiêu, và các bộ lọc tách các bước sóng phát xạ để mỗi kênh đọc một mục tiêu.
Dòng sản phẩm ToronPCR™ M áp dụng các nguyên tắc này với hệ thống quang học hình ảnh hàng đầu. Một đèn LED trắng công suất cao chiếu sáng đĩa thông qua các bộ lọc, các sợi quang truyền ánh sáng với tổn thất thấp, và một cảm biến CMOS đọc đồng thời tất cả 96 giếng, khoảng 1 giây mỗi kênh. Việc đọc đồng thời loại bỏ sự khác biệt về thời gian giữa các giếng và loại bỏ hiệu ứng biên trong đường dẫn quang học. Hệ thống điều khiển khối đa vùng giữ nhiệt độ đồng đều ở mức ±0.2 °C ở 95 °C.
Hệ thống PCR đa kênh thời gian thực - Thông số kỹ thuật dòng sản phẩm ToronPCR™ M
| Tham số | ToronPCR™ M4 (Mẫu 4 kênh) | ToronPCR™ M6 (Mẫu 6 kênh) |
|---|---|---|
| Ống nghiệm phù hợp (phiên bản 0.2 mL) | Đĩa 96 giếng 0.2 mL, ống đơn, ống 8 dải | Đĩa 96 giếng 0.2 mL, ống đơn, ống 8 dải |
| Ống nghiệm áp dụng (0.1 mL phiên bản "A") | Đĩa 96 giếng 0.1 mL, ống đơn, ống 8 dải | Đĩa 96 giếng 0.1 mL, ống đơn, ống 8 dải |
| Khối lượng mẫu | 10 đến 100 μL | 10 đến 100 μL |
| Số kênh | 4 | 6 |
| Kênh phát hiện / Thuốc nhuộm được sử dụng | F1: FAM, SYBR Green I, v.v.; F2: HEX, JOE, VIC, v.v.; F3: ROX, Texas Red; F4: Cy5, Quasar-670 | F1: FAM, SYBR Green I, v.v.; F2: HEX, JOE, VIC, v.v.; F3: ROX, Texas Red; F4: Cy5, Quasar-670; F5: Cy5.5; F6: có thể tùy chỉnh (mặc định là ATTO 425) |
| Dải động | 10⁰ đến 10¹⁰ bản sao/μL | 10⁰ đến 10¹⁰ bản sao/μL |
| Phát hiện tối thiểu | 1 bản sao | 1 bản sao |
| Nguồn sáng kích thích | Đèn LED trắng công suất cao | Đèn LED trắng công suất cao |
| Phát hiện phần tử | CMOS hiệu suất cao | CMOS hiệu suất cao |
| Độ lặp lại của CT | CV ≤ 1% | CV ≤ 1% |
| Độ tuyến tính của mẫu (Ct) | |r| ≥ 0.999 | |r| ≥ 0.999 |
| Phạm vi nhiệt độ | 4 đến 99.9 ° C | 4 đến 99.9 ° C |
| Chế độ kiểm soát nhiệt độ | Điều khiển khối / điều khiển ống | Điều khiển khối / điều khiển ống |
| Tỷ lệ sưởi ấm trung bình | 3.5 °C/giây | 3.5 °C/giây |
| Tốc độ làm mát trung bình | 2.5 °C/giây | 2.5 °C/giây |
| Đồng nhất nhiệt độ | ±0.2°C ở 95°C | ±0.2°C ở 95°C |
| Độ chính xác nhiệt độ | ± 0.15 ° C | ± 0.15 ° C |
| Kiểm soát nhiệt độ chính xác | 0.1 ° C | 0.1 ° C |
| Độ phân giải nhiệt độ nóng chảy | Chênh lệch tối thiểu 0.1 °C | Chênh lệch tối thiểu 0.1 °C |
| Chế độ chuyển màu | Điều khiển nhiệt độ theo thang bậc 6 vùng | Điều khiển nhiệt độ theo thang bậc 6 vùng |
| Phạm vi nhiệt độ chênh lệch | 1 đến 40 ° C | 1 đến 40 ° C |
| Nhiệt độ nắp được làm nóng | 30 đến 110 ° C | 30 đến 110 ° C |
| Giao diện | Màn hình cảm ứng 10.1-inch | Màn hình cảm ứng 10.1-inch |
| Kích thước (W × D × H) | 298 × 530 × 430 mm | 298 × 530 × 430 mm |
| input Power | 100 đến 240 V AC, 50 đến 60 Hz | 100 đến 240 V AC, 50 đến 60 Hz |
| cổng ngoài | 3 cổng USB (Loại A), 1 cổng LAN | 3 cổng USB (Loại A), 1 cổng LAN |
| Chức năng không dây | Truyền dẫn không dây mở rộng, hỗ trợ LIS | Truyền dẫn không dây mở rộng, hỗ trợ LIS |
| Định dạng xuất dữ liệu | Excel, PDF | Excel, PDF |