Sistema de PCR em tempo real (qPCR) – Termociclador quantitativo TT-Q4505T

Teoria central da quantificação por qPCR

Em vez de lidar com linhas de base instáveis ​​e leituras confusas, o sistema de PCR em tempo real TT-Q4505T combina o processo de cópia de fitas de DNA com a captura de imagens em alta velocidade dos marcadores fluorescentes enquanto a reação ainda está em andamento. 

Utilizando um sistema avançado de detecção por fibra óptica para acelerar a aquisição de imagens, esta máquina de qPCR não espera até o final para mostrar o resultado. Ela registra os valores exatos ciclo a ciclo diretamente em uma tela sensível ao toque de 7 polegadas, eliminando os cálculos complexos e fornecendo dados claros e concisos.

Monitoramento da Fase Exponencial

A estratégia principal baseia-se no rastreamento de substâncias químicas fluorescentes que brilham com mais intensidade sempre que uma nova sequência de DNA aparece. Alimentado por uma fonte de excitação LED brilhante e fotodiodos sensíveis, nosso sistema de PCR em tempo real registra essa luz exatamente no momento em que o sinal está aumentando mais rapidamente. Isso resulta em picos visivelmente mais nítidos e distintos para sua análise.

Metodologia do Ciclo de Quantificação (Cq/Ct)

Estamos buscando aquele instante preciso em que a fluorescência finalmente se destaca do ruído de fundo. É muito parecido com a localização de uma lanterna brilhante em um quarto completamente escuro. Esse número de ciclo específico indica exatamente a quantidade de material inicial que você adicionou ao tubo no começo, fornecendo precisão suficiente para detectar diferenças de concentração de até 1.5 vezes.

Sensibilidade e faixa de medição

Quando tudo está perfeitamente ajustado, é possível detectar até mesmo uma única cópia de um gene alvo. A precisão se mantém incrível em uma ampla gama de quantidades de amostra. Mais especificamente, estamos falando de uma faixa dinâmica linear de 10 logs, sem os problemas comuns encontrados em sistemas inferiores.

Engenharia e desempenho de ciclos térmicos

A forma como o termociclador quantitativo TT-Q4505T lida com a temperatura é algo completamente diferente. A maioria dos blocos térmicos de bancada padrão demora uma eternidade para aquecer ou esfriar, mas esta unidade compacta de 7.5 kg foi projetada para operar rapidamente e fornecer resultados precisos e previsíveis durante todo o processo.

Atingindo taxas máximas de aquecimento de 7.0 °C por segundo e resfriamento de 6.5 °C por segundo, ele transita entre os estágios quente, médio e frio tão rapidamente que pode até causar tontura. Enquanto outros modelos usam blocos de metal básicos que retêm o calor por muito tempo, nosso bloco de 45 poços e 0.2 mL utiliza componentes de bomba térmica de alta velocidade que garantem que cada reação permaneça exatamente no mesmo nível de temperatura simultaneamente. 

Com uma uniformidade de temperatura de ±0.25°C e uma precisão de ±0.15°C, não há nenhuma chance de um tubo estar mais quente que o outro. O processo é totalmente uniforme, mantendo todo o volume de reação de 20–120 µL fluindo sem qualquer problema, para que você não precise ficar na dúvida.

Modos de leitura de fluorescência e canais de detecção

Você tem várias maneiras de ver o que está acontecendo dentro dos tubos, e nossa configuração de 5 canais monitora a fluorescência de forma precisa. Ela é sensível o suficiente para captar cada detalhe, mas não tão intensa a ponto de mascarar os dados mais sutis.

• Corantes intercalantes não específicos: Esses pequenos marcadores químicos se ligam a qualquer DNA de fita dupla que encontrarem. É acessível, simples e funciona perfeitamente. Você só precisará observar a "curva de fusão" final na tela para verificar se não multiplicou acidentalmente algum material genético indesejado.
• Sondas específicas de sequência: Esses sensores funcionam como mísseis teleguiados para o seu gene específico. Eles só acendem quando encontram uma correspondência perfeita. Como o TT-Q4505T possui 5 filtros de canal de corante distintos, você pode procurar vários alvos diferentes simultaneamente no mesmo tubo, sem que os sinais ópticos se sobreponham. É rápido, incrivelmente inteligente e permite obter uma montanha de dados nítidos a partir de uma minúscula gota de amostra.