Système de PCR en temps réel (qPCR) – Thermocycleur quantitatif TT-Q4505T

Théorie de base de la quantification par qPCR

Au lieu de supporter des lignes de base instables et des lectures désordonnées, le système PCR en temps réel TT-Q4505T combine le processus de copie des brins d'ADN avec la capture d'instantanés à haute vitesse des traceurs lumineux pendant que la réaction est toujours en cours. 

Grâce à un système de détection par fibre optique de pointe qui accélère l'acquisition d'images, cet appareil qPCR ne se contente pas d'attendre la fin de la réaction pour vous en présenter les résultats. Il suit les données exactes cycle par cycle directement sur un élégant écran tactile de 7 pouces, simplifiant ainsi les calculs complexes et vous fournissant des données d'une clarté exceptionnelle.

Surveillance de la phase exponentielle

Notre stratégie repose sur le suivi des composés fluorescents dont l'intensité augmente à chaque nouvelle séquence d'ADN. Grâce à une source d'excitation LED haute luminosité et à des photodiodes sensibles, notre système PCR en temps réel enregistre cette lumière précisément au moment où le signal atteint son maximum. Il en résulte des pics nettement plus nets et précis pour votre analyse.

Méthodologie du cycle de quantification (Cq/Ct)

Nous recherchons l'instant précis où la fluorescence émerge enfin du bruit de fond. C'est un peu comme repérer une lampe torche puissante dans une pièce plongée dans l'obscurité. Ce numéro de cycle spécifique indique exactement la quantité de réactif initial introduite dans le tube, offrant une précision suffisante pour détecter des différences de concentration aussi faibles que 1.5 fois.

Sensibilité et plage de mesure

Lorsque tous les réglages sont parfaitement optimisés, il est possible de détecter même une seule copie d'un gène cible. La précision reste remarquable, même pour des quantités d'échantillons très variables. Plus précisément, nous parlons d'une plage dynamique linéaire de 10 ordres de grandeur, sans les problèmes habituels rencontrés avec les systèmes moins performants.

Ingénierie et performance des cycles thermiques

La gestion de la température par le thermocycleur quantitatif TT-Q4505T est tout à fait différente. La plupart des blocs de paillasse classiques mettent un temps considérable à chauffer ou à refroidir, mais cet appareil compact de 7.5 kg est conçu pour une rapidité d'exécution et des résultats fiables et prévisibles tout au long du processus.

Avec une vitesse de chauffe maximale de 7.0 °C par seconde et une vitesse de refroidissement de 6.5 °C par seconde, il passe d'une phase à l'autre (chaud, moyen et froid) à une vitesse vertigineuse. Contrairement à d'autres modèles qui utilisent de simples blocs métalliques retenant la chaleur trop longtemps, notre bloc 45 puits de 0.2 mL est équipé d'une pompe thermique ultra-rapide qui garantit une température constante et uniforme pour chaque réaction. 

Avec une uniformité de température de ±0.25 °C et une précision de ±0.15 °C, il est impossible qu'un tube soit plus chaud qu'un autre. La température est parfaitement homogène, assurant un déroulement sans accroc du volume réactionnel de 20 à 120 µL, pour une précision optimale.

Modes de lecture de la fluorescence et canaux de détection

Vous disposez de plusieurs moyens pour observer ce qui se passe à l'intérieur des tubes, et notre configuration à 5 canaux surveille la fluorescence avec une précision remarquable. Elle est suffisamment sensible pour capter chaque détail, sans pour autant masquer les données les plus fines.

• Colorants intercalants non spécifiques : Ces petits marqueurs chimiques se fixent à toute séquence d'ADN double brin qu'ils rencontrent. C'est abordable, simple et d'une efficacité redoutable. Il vous suffira de vérifier la courbe de fusion finale affichée à l'écran pour vous assurer que vous n'avez pas multiplié accidentellement des fragments d'ADN indésirables.
• Sondes spécifiques à une séquence : Ces sondes agissent comme des missiles à tête chercheuse pour votre gène spécifique. Elles ne s'illuminent que lorsqu'elles trouvent une correspondance parfaite. Grâce aux 5 filtres à canaux de colorants distincts intégrés au TT-Q4505T, vous pouvez analyser simultanément plusieurs cibles différentes dans un même tube, sans que les signaux optiques ne s'entremêlent. Rapide et incroyablement intelligent, il transforme une simple goutte d'échantillon en une multitude de données d'une clarté exceptionnelle.