Echtzeit-PCR-System (qPCR) – Quantitativer Thermocycler TT-Q4505T

Kerntheorie der qPCR-Quantifizierung

Statt sich mit wackeligen Ausgangswerten und ungenauen Messwerten abzufinden, kombiniert das TT-Q4505T Real-Time PCR System den Prozess des Kopierens von DNA-Strängen mit der Aufnahme von Hochgeschwindigkeitsaufnahmen der leuchtenden Tracer, während die Reaktion noch läuft. 

Dank eines fortschrittlichen optischen Faserdetektors, der die Bildgebung beschleunigt, liefert dieses qPCR-Gerät die Ergebnisse nicht erst nach Abschluss der Reaktion. Es erfasst die exakten Werte Zyklus für Zyklus direkt auf einem eleganten 7-Zoll-Touchscreen, vereinfacht so die Berechnung und liefert Ihnen eine Fülle übersichtlicher Daten.

Überwachung der exponentiellen Phase

Die Kernstrategie beruht auf der Erfassung fluoreszierender Substanzen, deren Leuchtkraft mit jedem neu auftretenden DNA-Abschnitt zunimmt. Unser Echtzeit-PCR-System, ausgestattet mit einer leistungsstarken LED-Anregungsquelle und hochempfindlichen Fotodioden, zeichnet dieses Licht genau in dem Moment auf, in dem das Signal am schnellsten ansteigt. Dies führt zu deutlich schärferen und klareren Peaks für Ihre Analyse.

Quantifizierungszyklus (Cq/Ct) Methodik

Wir suchen genau den Moment, in dem die Fluoreszenz sich deutlich vom Hintergrundrauschen abhebt. Es ist vergleichbar mit dem Erkennen einer hellen Taschenlampe in einem stockdunklen Raum. Die jeweilige Zyklusnummer gibt exakt an, wie viel Ausgangsmaterial zu Beginn in das Reagenzglas gegeben wurde, und ermöglicht so eine präzise Messung, um Konzentrationsunterschiede von nur 1.5-fach zu erkennen.

Empfindlichkeit und Messbereich

Wenn alle Einstellungen optimal sind, lässt sich selbst eine einzelne Kopie eines Zielgens nachweisen. Die Genauigkeit bleibt über einen weiten Bereich von Probenmengen hinweg unglaublich hoch. Konkret sprechen wir von einem linearen dynamischen Bereich von 10 Zehnerpotenzen – ohne die üblichen Probleme, die bei weniger leistungsfähigen Systemen häufig auftreten.

Thermische Zyklentechnik und Leistung

Die Art und Weise, wie der TT-Q4505T Quantitative Thermal Cycler die Temperatur handhabt, ist einzigartig. Die meisten herkömmlichen Tischgeräte benötigen ewig zum Aufheizen oder Abkühlen, doch dieses kompakte 7.5 kg leichte Gerät ist auf schnelles Arbeiten und zuverlässige, vorhersehbare Ergebnisse ausgelegt.

Mit maximalen Aufheizraten von 7.0 °C pro Sekunde und Abkühlraten von 6.5 °C pro Sekunde wechselt es so schnell zwischen den heißen, mittleren und kalten Phasen, dass einem schwindlig werden kann. Während andere Modelle einfache Metallblöcke verwenden, die die Wärme viel zu lange speichern, nutzt unser 45-Well-Block mit 0.2 ml Volumen blitzschnelle Thermopumpen, die dafür sorgen, dass jede einzelne Reaktion gleichzeitig auf dem exakt gleichen Temperaturniveau bleibt. 

Dank einer Temperaturhomogenität von ±0.25 °C und einer Genauigkeit von ±0.15 °C ist ausgeschlossen, dass ein Reaktionsgefäß wärmer als das andere ist. Die Temperaturverteilung ist absolut gleichmäßig, sodass das gesamte Reaktionsvolumen von 20–120 µL reibungslos und ohne Störungen fließt – Sie müssen also nicht raten.

Fluoreszenz-Auslesemodi und Detektionskanäle

Sie haben mehrere Möglichkeiten, die Vorgänge in den Röhrchen zu beobachten, und unsere 5-Kanal-Konfiguration überwacht die Fluoreszenz präzise. Sie ist empfindlich genug, um jedes Detail zu erfassen, aber nicht so stark, dass die feinen Daten verloren gehen.

• Nicht-spezifische Interkalationsfarbstoffe: Diese kleinen chemischen Marker binden sich an jede doppelsträngige DNA, auf die sie treffen. Es ist kostengünstig, unkompliziert und funktioniert einwandfrei. Sie sollten lediglich die finale Schmelzkurve auf Ihrem Bildschirm überprüfen, um sicherzustellen, dass Sie nicht versehentlich genetischen Abfall vervielfältigt haben.
• Sequenzspezifische Sonden: Diese Sensoren funktionieren wie zielsuchende Raketen, die Ihr spezifisches Gen finden. Sie leuchten nur auf, wenn sie eine perfekte Übereinstimmung finden. Da der TT-Q4505T mit 5 separaten Farbstoffkanalfiltern ausgestattet ist, können Sie mehrere verschiedene Ziele gleichzeitig im selben Röhrchen untersuchen, ohne dass sich die optischen Signale stören. Er ist blitzschnell, unglaublich intelligent und liefert Ihnen aus einem winzigen Tropfen Probe eine Fülle gestochen scharfer Daten.